2D versus 3D cell culture models — jak architektura hodowli wpływa na ekspresję genów i odpowiedź komórkową?

2D cell culture i 3D cell culture to nie tylko dwa różne formaty prowadzenia eksperymentu, ale dwa odmienne sposoby organizacji komórek w przestrzeni. Architektura hodowli komórkowej wpływa na adhezję, proliferację, migrację, ekspresję genów w hodowli komórkowej oraz odpowiedź komórkową na bodźce i leki. Dlatego wybór między modelem 2D i 3D powinien wynikać z celu badania, typu komórek oraz dostępnych produktów do hodowli komórkowej.

Spis treści

Dlaczego architektura hodowli komórkowej zmienia zachowanie komórek?

Komórka w naczyniu laboratoryjnym nie funkcjonuje w próżni. O jej fenotypie decydują nie tylko skład pożywki, temperatura, stężenie CO₂ i czas inkubacji, ale także geometria powierzchni, kontakt z innymi komórkami, dostęp do tlenu, gradienty składników odżywczych oraz sygnały mechaniczne.

W klasycznej hodowli komórkowej 2D komórki rosną najczęściej jako monowarstwa na płaskiej powierzchni. Taki układ jest prosty, powtarzalny i bardzo wygodny w codziennej pracy laboratoryjnej. Ułatwia mikroskopię, pasażowanie, transfekcję, barwienia oraz szybkie testy żywotności. Z tego powodu 2D nadal pozostaje jednym z podstawowych rozwiązań w badaniach biologii komórki.

W hodowli komórkowej 3D komórki tworzą struktury przestrzenne. Mogą to być agregaty, spheroids, organoids, modele oparte na macierzy zewnątrzkomórkowej albo bardziej złożone układy z kilkoma typami komórek. Dzięki temu komórki odbierają inne sygnały niż w monowarstwie, co może prowadzić do zmian w morfologii, metabolizmie, proliferacji, migracji, ekspresji genów i odpowiedzi na leki. Przeglądy naukowe wskazują, że modele 3D często lepiej odwzorowują wybrane cechy środowiska tkankowego, ale jednocześnie są trudniejsze do standaryzacji niż klasyczne modele 2D.

Najważniejsza różnica polega więc na tym, że 2D upraszcza środowisko komórki, a 3D dodaje wymiar przestrzenny, który zmienia sposób komunikacji komórek.

2D cell culture — kiedy klasyczna hodowla na płaskiej powierzchni nadal ma sens?

Modele 2D bywają krytykowane za uproszczenie warunków biologicznych, ale w praktyce laboratoryjnej nadal mają bardzo mocną pozycję. Nie każda procedura wymaga modelu 3D. Czasami najważniejsza jest prostota, szybkość, niski koszt, łatwość obserwacji i możliwość uzyskania dużej liczby powtarzalnych wyników.

Główne zalety hodowli komórkowej 2D

Hodowla 2D sprawdza się szczególnie dobrze wtedy, gdy laboratorium potrzebuje szybkiego i kontrolowanego modelu do rutynowego prowadzenia komórek. W takim układzie łatwo ocenić konfluencję, morfologię, kontaminację, efektywność pasażowania oraz podstawową odpowiedź komórkową.

W codziennej pracy z komórkami adherentnymi duże znaczenie mają odpowiednio dobrane flaski do hodowli komórkowej adherentnej TC-treated, szalki do hodowli komórkowej adherentnej TC-treated oraz płytki testowe do hodowli komórkowej adherentnej TC-treated. Kategoria hodowli komórki w Googlab obejmuje m.in. naczynia TC-treated, Non-treated, inserty, płytki i szalki ze szklanym dnem, kolby Erlenmeyera, kolby wielowarstwowe oraz systemy do filtracji próżniowej.

Ograniczenia hodowli 2D

Największe ograniczenie wynika z samej geometrii. Komórki rosną na płaskiej, często znacznie sztywniejszej niż naturalna tkanka powierzchni. Może to wpływać na ich kształt, polaryzację, organizację cytoszkieletu, adhezję komórek oraz aktywność szlaków sygnałowych.

W efekcie różnice między hodowlą 2D i 3D mogą być widoczne szczególnie w badaniach nad nowotworami, odpowiedzią na leki, migracją, inwazją, metabolizmem i interakcjami z mikrośrodowiskiem. Nie oznacza to, że model 2D jest błędny. Oznacza to, że odpowiada na inne pytania badawcze niż model przestrzenny.

3D cell culture — co zmienia hodowla przestrzenna?

W modelu 3D komórki nie są zmuszone do wzrostu wyłącznie w jednej płaszczyźnie. Tworzą przestrzenne układy, w których znaczenie mają kontakty komórka–komórka, lokalne gradienty tlenu i składników odżywczych, zmiany dostępności leków oraz oddziaływania z macierzą.

3D cell culture pozwala badać procesy, które w modelu 2D mogą być słabo widoczne albo zbyt uproszczone. Dotyczy to zwłaszcza biologii nowotworów, modeli przedklinicznych, toksykologii, farmakologii, regeneracji tkanek i badań nad mikrośrodowiskiem komórkowym.

Spheroids — prosty i popularny model 3D

Spheroids to przestrzenne agregaty komórek, które mogą tworzyć bardziej zbliżone do tkanki gradienty tlenu, składników odżywczych, metabolitów i leków. W sferoidach komórki zewnętrzne mogą mieć inne warunki niż komórki położone głębiej. To istotne na przykład w badaniach nad odpowiedzią guzów na leki, ponieważ penetracja substancji aktywnej przez strukturę 3D może być ograniczona.

Przy pracy z modelami agregacyjnymi lub komórkami rosnącymi w zawiesinie warto rozważyć płytki do hodowli komórkowej w zawiesinie Non-treated. W badaniach migracji, barier komórkowych i oddziaływań międzykomórkowych przydatne mogą być także inserty do hodowli komórkowych.

Organoids — bardziej złożone modele przestrzenne

Organoids to zwykle bardziej złożone struktury 3D, często tworzone z komórek macierzystych lub materiału pierwotnego, które mogą częściowo odtwarzać wybrane cechy organizacji tkanki lub narządu. Literatura naukowa rozróżnia spheroids i organoids jako różne typy 3D cell culture models, wykorzystywane m.in. w onkologii, biologii rozwoju, medycynie personalizowanej i badaniach przedklinicznych.

Warto jednak zachować precyzję: organoid nie jest pełnym narządem w miniaturze. Jest modelem in vitro, który może odtwarzać wybrane cechy tkanki, ale nie obejmuje całej złożoności organizmu.

Tabela 1. Hodowla 2D i 3D — szybkie porównanie dla laboratorium

KryteriumHodowla komórkowa 2DHodowla komórkowa 3D
Organizacja komórekMonowarstwa na płaskiej powierzchniStruktury przestrzenne, np. spheroids, organoids, agregaty lub układy w macierzy
Poziom złożonościNiższyWyższy
StandaryzacjaZwykle łatwiejszaWymaga kontroli wielkości, geometrii i jednorodności struktur
MikroskopiaProsta obserwacja w świetle przechodzącym lub fluorescencjiCzęsto wymaga dodatkowej optymalizacji obrazowania
Proliferacja komórekŁatwa do oceny w monowarstwieMoże być zróżnicowana przestrzennie
Ekspresja genów w hodowli komórkowejMoże odzwierciedlać uproszczony fenotypMoże lepiej uwzględniać wpływ mikrośrodowiska
Odpowiedź na leki w hodowli komórkowejDobra do wstępnych testów przesiewowychPrzydatna w bardziej translacyjnych modelach przedklinicznych
Koszt i czasZwykle niższeZwykle wyższe
Najlepsze zastosowaniaRutynowa hodowla, screening, podstawowa biologia komórkiFarmakologia, toksykologia, migracja, inwazja, modele tkankowe

Ekspresja genów w hodowli komórkowej 2D i 3D — skąd biorą się różnice?

Jednym z najważniejszych powodów, dla których porównuje się modele 2D i 3D, jest wpływ architektury hodowli na profil molekularny komórek. Komórka rosnąca na płaskiej powierzchni może aktywować inne programy biologiczne niż komórka osadzona w przestrzennej strukturze.

Na ekspresję genów mogą wpływać między innymi:

  • liczba i jakość kontaktów komórka–komórka,
  • kontakt z macierzą zewnątrzkomórkową,
  • sztywność podłoża,
  • dostęp do tlenu,
  • gradienty składników odżywczych,
  • lokalne stężenie metabolitów,
  • różnice w proliferacji komórek,
  • stopień zróżnicowania komórek,
  • czas prowadzenia hodowli.

Modele 3D mogą więc prowadzić do zmian w ekspresji genów związanych z adhezją, metabolizmem, przeżyciem, hipoksją, cyklem komórkowym, różnicowaniem i odpowiedzią na stres. Przeglądy porównujące 2D i 3D wskazują, że różnice mogą dotyczyć zarówno ekspresji genów, jak i białek oraz funkcjonalnej odpowiedzi komórek.

Nie oznacza to jednak, że hodowla 3D zawsze daje „bardziej prawdziwy” wynik. Wynik z 3D jest bardziej złożony, ale także bardziej zależny od parametrów technicznych. Znaczenie mają m.in. typ komórek, liczba komórek wysianych na well, rodzaj płytki, obecność macierzy, czas formowania struktury, średnica sferoidu oraz metoda analizy RNA lub białka.

Jeżeli analiza obejmuje obrazowanie struktur komórkowych, fluorescencję lub mikroskopię wysokiej rozdzielczości, praktyczne znaczenie mogą mieć płytki i szalki ze szklanym dnem, ponieważ pozwalają prowadzić obserwację bez niepotrzebnego przenoszenia próbki.

Odpowiedź na leki w hodowli komórkowej — dlaczego wyniki 2D i 3D mogą się różnić?

W badaniach farmakologicznych wybór modelu ma szczególne znaczenie. Związek, który silnie działa w monowarstwie 2D, może wykazywać słabszą aktywność w modelu 3D. Przyczyną nie musi być błąd eksperymentu. Może to wynikać z innej biologii modelu.

W strukturach 3D lek musi dotrzeć do komórek położonych głębiej. Po drodze może napotkać bariery dyfuzyjne, zmienione pH, strefy o niższym stężeniu tlenu oraz komórki o innym stanie metabolicznym. W badaniach nad 3D cell culture opisywano różnice w odpowiedzi na leki w porównaniu z hodowlami 2D, w tym większą oporność wybranych modeli 3D na związki przeciwnowotworowe.

Dlatego odpowiedź na leki w hodowli komórkowej powinna być interpretowana w kontekście zastosowanego modelu. 2D może być bardzo użyteczne do wstępnego screeningu, porównywania dużej liczby związków i szybkiej optymalizacji dawek. 3D może być lepszym wyborem wtedy, gdy badanie ma charakter przedkliniczny i wymaga uwzględnienia penetracji leku, interakcji komórkowych, mikrośrodowiska lub zjawisk podobnych do tych obserwowanych w tkance.

W testach lekowych duże znaczenie ma także technika przygotowania odczynników i pożywek. Do etapów filtracji można wykorzystać filtry strzykawkowe, a przy pracy z większymi objętościami medium praktyczne są pipety serologiczne oraz akcesoria z kategorii pipetowanie i dozowanie. Googlab opisuje filtry strzykawkowe jako sterylne, jednorazowe akcesoria do filtracji próbek, a pipety serologiczne jako produkty przydatne przy pracy z większymi objętościami i procedurach wymagających sterylności.

Tabela 2. Kiedy wybrać 2D, kiedy 3D, a kiedy oba modele równolegle?

Cel badaniaModel 2DModel 3DPraktyczna rekomendacja
Rutynowe namnażanie komórekBardzo dobre rozwiązanieZwykle nie jest konieczneZacznij od 2D
Ocena morfologii i konfluencjiBardzo wygodnaTrudniejsza2D do kontroli rutynowej
Wstępny screening związkówSzybki i ekonomicznyWolniejszy, ale biologicznie bardziej złożony2D jako etap pierwszy
Odpowiedź na lekiDobra do porównań podstawowychLepsza do wybranych modeli przedklinicznych2D + 3D dla mocniejszych wniosków
Ekspresja genówDobra przy prostym pytaniu badawczymLepsza, gdy ważne jest mikrośrodowisko komórkoweDobierz model do hipotezy
Migracja komórekMożliwa w prostych testachCzęsto bardziej informacyjnaRozważ 3D lub inserty
OrganoidsNie dotyczyModel właściwyWybierz 3D
SpheroidsNie dotyczyModel właściwyWybierz 3D

Jak mikrośrodowisko komórkowe wpływa na adhezję, proliferację i migrację komórek?

Mikrośrodowisko komórkowe to suma warunków, które komórka „odczuwa” lokalnie. Obejmuje skład pożywki, obecność czynników wzrostu, tlen, metabolity, sąsiednie komórki, macierz zewnątrzkomórkową, geometrię naczynia i właściwości fizyczne podłoża.

W 2D adhezja komórek zachodzi głównie względem płaskiej powierzchni. Komórki rozpłaszczają się, łatwo tworzą monowarstwę i są wygodne do obserwacji. W 3D komórki mogą kontaktować się z innymi komórkami z wielu stron, tworzyć agregaty, remodelować otoczenie i reagować na lokalne gradienty.

To wpływa na trzy kluczowe procesy:

  1. Adhezja komórek — w 2D dominuje kontakt z powierzchnią naczynia, w 3D większe znaczenie mogą mieć interakcje komórka–komórka i komórka–macierz.
  2. Proliferacja komórek — w 3D tempo podziałów może różnić się pomiędzy komórkami na zewnątrz i wewnątrz struktury.
  3. Migracja komórek — w 3D ruch komórek może bardziej zależeć od geometrii, gęstości macierzy, degradacji ECM i gradientów chemicznych.

Właśnie dlatego modele 3D są często stosowane w badaniach biologii komórki dotyczących migracji, inwazji nowotworowej, gojenia ran, angiogenezy, morfogenezy i interakcji z mikrośrodowiskiem. Jednocześnie wymagają lepszej kontroli technicznej, bo małe różnice w przygotowaniu modelu mogą zwiększyć zmienność danych.

Najczęstsze problemy w hodowli 3D i jak je ograniczyć

Wdrożenie modelu 3D nie musi być skomplikowane, ale wymaga większej dyscypliny niż klasyczna hodowla 2D. Najczęstsze problemy nie wynikają z samej biologii, lecz z braku standaryzacji procedury.

Problem 1: niejednorodne spheroids

Jeżeli sferoidy różnią się wielkością, różnić się będzie także dyfuzja tlenu, składników odżywczych i leków. To może utrudnić interpretację wyników.

Jak ograniczyć problem?

  • stosować tę samą liczbę komórek na well,
  • utrzymywać stały czas formowania sferoidów,
  • dokumentować średnicę i morfologię struktur,
  • nie mieszać w jednej analizie sferoidów o skrajnie różnej wielkości,
  • zaplanować odpowiednią liczbę replikatów technicznych i biologicznych.

Problem 2: trudniejsza analiza RNA, białek i obrazowania

Modele 3D mogą wymagać intensywniejszej lizy, optymalizacji ekstrakcji materiału i innego sposobu normalizacji danych. Obrazowanie może być trudniejsze, ponieważ sygnał z komórek położonych głębiej może być słabszy lub wymagać specjalnych ustawień mikroskopu.

Jak ograniczyć problem?

  • dobrać metodę lizy do typu modelu,
  • zwiększyć liczbę struktur zbieranych do jednej próbki,
  • walidować izolację RNA lub białka przed właściwym eksperymentem,
  • stosować kontrolę jakości materiału,
  • dopasować barwienie do grubości i gęstości próbki.

Problem 3: zmienność wynikająca z pipetowania i sterylności

W modelach 3D nawet niewielkie różnice w objętości, liczbie komórek lub czasie inkubacji mogą zmienić końcowy wynik. Dlatego znaczenie mają powtarzalne akcesoria, stabilna technika pracy i kontrola kontaminacji.

Przy przygotowywaniu pożywek i roztworów pomocne mogą być systemy do filtracji próżniowej. Przy skalowaniu hodowli warto rozważyć kolby wielowarstwowe albo kolby Erlenmeyera. W ofercie Googlab kategoria hodowli komórki obejmuje m.in. systemy filtracji, kolby wielowarstwowe i kolby Erlenmeyera, a opisy kategorii wskazują ich zastosowanie w pracy laboratoryjnej i hodowlach komórkowych.

Tabela 3. Ciche obiekcje laboratoriów przy przejściu z 2D na 3D

ObiekcjaCo warto wiedzieć?Praktyczne rozwiązanie
„Czy 3D nie jest zbyt skomplikowane?”3D jest bardziej wymagające, ale można zacząć od prostych sferoidów.Wdrożyć model etapowo: 2D → prosty spheroid → bardziej złożone układy.
„Czy wyniki będą powtarzalne?”Powtarzalność zależy od kontroli liczby komórek, czasu i geometrii.Ustalić SOP, kontrolować wielkość struktur i zwiększyć liczbę replikatów.
„Czy muszę rezygnować z 2D?”Nie. 2D i 3D mogą być modelami komplementarnymi.Używać 2D do screeningu, a 3D do walidacji.
„Czy 3D zawsze daje lepsze dane?”Nie zawsze. Model musi pasować do pytania badawczego.Najpierw zdefiniować hipotezę i punkt końcowy analizy.
„Czy potrzebuję innych materiałów?”Często tak, zwłaszcza przy modelach zawiesinowych, insertach, filtracji i obrazowaniu.Dobrać naczynia, płytki, inserty, pipety i filtry do protokołu.

Jak dobrać model hodowli komórkowej do celu badania?

Najlepszy model to nie ten, który jest najbardziej zaawansowany, ale ten, który najlepiej odpowiada na pytanie badawcze. Model powinien być dobrany do hipotezy, metody analizy i ograniczeń laboratorium.

Gdy celem jest rutynowa hodowla i podstawowa analiza komórek

Wybierz 2D cell culture, jeśli celem jest namnażanie komórek, ocena morfologii, kontrola konfluencji, pasażowanie, podstawowe testy żywotności lub szybka optymalizacja warunków.

To praktyczny wybór dla laboratoriów, które prowadzą regularną hodowlę komórek in vitro i potrzebują stabilnego, prostego modelu do codziennej pracy.

Gdy celem jest odpowiedź na leki lub model przedkliniczny

Rozważ 3D cell culture, jeżeli badanie dotyczy penetracji leku, oporności, cytotoksyczności, mikrośrodowiska, inwazji, angiogenezy albo bardziej translacyjnych modeli przedklinicznych.

W takim przypadku model 3D nie powinien być dodatkiem „dla efektu”, ale świadomym wyborem metodologicznym. Trzeba wcześniej ustalić, co będzie mierzone: żywotność, ekspresja genów, metabolizm, obrazowanie, stężenie białka, morfologia czy migracja komórek.

Gdy celem jest porównanie biologii komórek w różnych warunkach

Najsilniejsze dane często powstają wtedy, gdy 2D i 3D są stosowane równolegle. Model 2D daje prosty punkt odniesienia, a model 3D pokazuje, jak komórki reagują po dodaniu organizacji przestrzennej.

Takie podejście jest szczególnie wartościowe, gdy laboratorium chce wykazać, że badana odpowiedź komórkowa zależy od architektury hodowli komórkowej.

Jakie materiały laboratoryjne wspierają powtarzalną hodowlę 2D i 3D?

Powtarzalność modelu biologicznego zależy nie tylko od komórek i pożywki. Znaczenie mają także naczynia, powierzchnie hodowlane, pipety, końcówki, filtry, sterylność i sposób przygotowania próbek.

W praktyce laboratorium prowadzące modele hodowli komórkowej powinno zwrócić uwagę na kilka grup materiałów:

Dobre materiały nie zastępują dobrze zaprojektowanego protokołu, ale ograniczają zmienność, która może zafałszować wynik eksperymentu.

2D czy 3D — praktyczna rekomendacja dla laboratoriów

Jeżeli laboratorium dopiero rozwija kompetencje w zakresie modeli 2D i 3D, najbezpieczniej potraktować te systemy jako narzędzia komplementarne.

Wybierz 2D, gdy:

  • potrzebujesz szybkiej i ekonomicznej hodowli,
  • chcesz łatwo obserwować morfologię komórek,
  • wykonujesz rutynowe pasażowanie,
  • prowadzisz wstępny screening,
  • analizujesz podstawową proliferację komórek,
  • zależy Ci na prostym i powtarzalnym modelu.

Wybierz 3D, gdy:

  • interesuje Cię mikrośrodowisko komórkowe,
  • oceniasz odpowiedź na leki w hodowli komórkowej,
  • pracujesz nad modelami przedklinicznymi,
  • badasz migrację komórek lub inwazję,
  • porównujesz spheroids albo organoids,
  • chcesz sprawdzić wpływ architektury hodowli komórkowej na ekspresję genów.

Stosuj 2D i 3D równolegle, gdy:

  • chcesz porównać prosty model referencyjny z bardziej złożonym modelem przestrzennym,
  • zależy Ci na mocniejszej interpretacji danych,
  • przygotowujesz publikację, walidację metody albo badanie R&D,
  • wynik z 2D nie wyjaśnia w pełni obserwowanej biologii.

Najbardziej praktyczne podejście to rozpoczęcie od modelu 2D, a następnie rozszerzenie badania o 3D tam, gdzie wymaga tego pytanie badawcze. W ten sposób laboratorium unika niepotrzebnej komplikacji, ale nie traci możliwości uzyskania bardziej biologicznie złożonych danych.

FAQ — najczęstsze pytania o hodowlę 2D i 3D

Czy hodowla 3D jest zawsze lepsza niż hodowla 2D?

Nie. Hodowla komórkowa 3D jest bardziej złożona i może lepiej odtwarzać wybrane elementy mikrośrodowiska komórkowego, ale hodowla komórkowa 2D jest prostsza, tańsza i łatwiejsza do standaryzacji. Wybór zależy od celu badania.

Czy modele 3D zmieniają ekspresję genów?

Tak, mogą zmieniać. Ekspresja genów w hodowli komórkowej zależy m.in. od kontaktów między komórkami, geometrii modelu, dostępności tlenu, składników odżywczych, macierzy i sygnałów mechanicznych. Dlatego wynik z modelu 3D może różnić się od wyniku uzyskanego w monowarstwie 2D.

Czym różnią się spheroids i organoids?

Spheroids to zwykle agregaty komórkowe tworzące strukturę przestrzenną. Organoids są bardziej złożonymi modelami 3D, które mogą częściowo odtwarzać wybrane cechy organizacji tkanki lub narządu. Oba rozwiązania należą do 3D cell culture models, ale nie są tym samym.

Czy w badaniach leków warto używać modelu 3D?

Często tak, szczególnie gdy badanie ma charakter przedkliniczny. Odpowiedź na leki w hodowli komórkowej 3D może różnić się od wyników w 2D, ponieważ w strukturze przestrzennej znaczenie mają penetracja leku, gradienty, mikrośrodowisko komórkowe i stan metaboliczny komórek.

Jak zacząć pracę z modelem 3D w laboratorium?

Najlepiej zacząć od prostego, dobrze kontrolowanego modelu, np. sferoidów, i porównać go z dotychczasową hodowlą 2D. Kluczowe są: liczba wysiewanych komórek, dobór płytki, czas formowania struktury, sterylność, powtarzalność pipetowania i metoda analizy końcowej.

Podsumowanie

Różnice między hodowlą 2D i 3D wynikają przede wszystkim z architektury modelu. W 2D komórki rosną na płaskiej powierzchni, co daje prostotę, kontrolę i wysoką powtarzalność. W 3D komórki tworzą struktury przestrzenne, które mogą lepiej uwzględniać kontakty międzykomórkowe, gradienty, mikrośrodowisko i odpowiedź na leki.

Nie ma jednak jednego uniwersalnego rozwiązania. 2D cell culture pozostaje praktycznym standardem do rutynowej hodowli, screeningu i podstawowych analiz. 3D cell culture jest wartościowe tam, gdzie liczy się przestrzenna organizacja komórek, ekspresja genów, migracja, odpowiedź komórkowa i bardziej złożone in vitro models.

Najlepsze podejście w wielu laboratoriach to wykorzystanie 2D jako modelu referencyjnego, a 3D jako modelu rozszerzającego lub walidacyjnego.

CTA

Dobór modelu hodowli to dopiero pierwszy krok. Powtarzalność wyników zależy również od jakości naczyń, powierzchni hodowlanych, pipetowania, filtracji i pracy sterylnej.

Sprawdź ofertę Googlab Scientific w kategorii hodowla komórki i dobierz materiały do swojego protokołu: flaski TC-treated, płytki do hodowli komórkowej, inserty, pipety serologiczne, filtry strzykawkowe i systemy do filtracji próżniowej.

Źródła

  1. Kapałczyńska M. et al., „2D and 3D cell cultures – a comparison of different types of cancer cell cultures”
  2. Duval K. et al., „Modeling Physiological Events in 2D vs. 3D Cell Culture”
  3. Edmondson R. et al., „Three-Dimensional Cell Culture Systems and Their Applications in Drug Discovery and Cell-Based Biosensors”
  4. Fang Y., Eglen R.M., „Three-Dimensional Cell Cultures in Drug Discovery and Development”
  5. Breslin S., O’Driscoll L., „The relevance of using 3D cell cultures, in addition to 2D monolayer cultures, when evaluating breast cancer drug sensitivity and resistance”
  6. Gunti S. et al., „Organoid and Spheroid Tumor Models: Techniques and Applications”